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培養(yǎng)細(xì)胞用血清是否需要熱滅活??

2019-01-25 08:54:11  1866 次瀏覽

中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為血清中的補(bǔ)體等會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),所以要滅活。但事實(shí)上,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用的血清真的必須進(jìn)行熱滅活嗎。其實(shí)不然,新的觀點(diǎn)認(rèn)為,只有對(duì)補(bǔ)體敏感的細(xì)胞才需要熱滅清。

的補(bǔ)體參具有溶細(xì)胞活性,刺激平滑肌的收縮,細(xì)肥大胞和血小板釋放組胺,淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化,增強(qiáng)吞噬作用。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅清。

實(shí)驗(yàn)顯示,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)而言,所用的血清是不需要熱滅活的。經(jīng)此熱滅活的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,從而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

如果必須做血清的熱滅活,應(yīng)遵循56℃、30分鐘的原則,熱滅活過程中隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高、時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。

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