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食源性致病菌菌株保藏方法!

2019-01-21 09:55:07  1671 次瀏覽

中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)對(duì)于每個(gè)陽(yáng)性樣品,保存檢出的食源性致病菌分離株,以便用于進(jìn)一步的研究;分離菌株的編號(hào)應(yīng)具有性,標(biāo)識(shí)清楚;標(biāo)簽應(yīng)防水、字跡耐凍;各省級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立食源性致病菌菌種庫(kù),妥善保存食源性致病菌分離株。

推薦常見(jiàn)的食源性致病菌菌株保藏方法有以下2種:

1.甘油冷凍保藏法

(1)保藏時(shí)間

本方法適合于菌種的長(zhǎng)期保藏,保藏時(shí)間可達(dá)10年以上。

(2)方法

在充分加熱混勻的BHI(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌保存時(shí)BHI中NaCl應(yīng)加至3%)中加入甘油,使甘油達(dá)總體積的40%~50%,充分混合,分裝至菌種保存管(2mL左右),121℃高壓20min,備用;使用無(wú)菌棉簽從非選擇性平板上取新鮮純培養(yǎng)菌落,加入裝有BHI和甘油的無(wú)菌凍存管中,混勻后,-80℃保存(如果無(wú)-80℃冰箱,可選擇-40℃保存,但保存效果較差)。

(3)注意事項(xiàng)

每株菌至少保存2管,分別放置在2個(gè)不同凍存盒中,一盒日常使用,另外一盒長(zhǎng)期保存;使用時(shí),取出相應(yīng)的凍存盒,快速接種,以避免反復(fù)凍融;使用時(shí),無(wú)菌操作,避免污染。

2.半固體保藏法

(4)保藏時(shí)間

本方法適合于短期菌種保藏,保藏時(shí)間一般為3~6個(gè)月。

(5)方法

無(wú)菌操作,挑取待保藏的菌種,穿刺接種約含5mL無(wú)菌半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂或半固體腦心浸液瓊脂(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌保存時(shí)BHI中NaCl應(yīng)加3%)的小試管(約15mm×100mm)中。無(wú)菌操作吸取液體石蠟,加入已培養(yǎng)好的菌種上面,液體石蠟用量以高出半固體1cm 為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕。將試管直立,置4℃或室溫(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌)下保存。

(6) 注意事項(xiàng)

副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌應(yīng)放置室溫保存。

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