HEPES是兩性離子有機(jī)化學(xué)緩沖劑，屬于二十個(gè) Good 的緩沖區(qū)之一，它不與金屬離子結(jié)合，極易溶于水。經(jīng)常被添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中使用。雖然它對(duì)細(xì)胞沒(méi)有營(yíng)養(yǎng)，但是在細(xì)胞培養(yǎng)需要在 CO2 培養(yǎng)箱外進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間操作時(shí)，添加 10–25 mm HEPES 可提供額外的緩沖能力孵化器為細(xì)胞提供一個(gè)良好的PH環(huán)境。

HEPES 緩沖區(qū)具有以下特征：

1、HEPES 的 pKa 取決于溫度：例如①在 25oC：pKa= 7.48 ②在 37oC：pKa= 7.31

2、在水溶液中有良好的溶解性，水溶液無(wú)色透明；

3、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)生物沒(méi)有毒性且對(duì)生物膜無(wú)明顯的滲透作用：

4、對(duì)紫外波無(wú)特征吸收，在波長(zhǎng)小于230-240nm時(shí)才有微弱的吸收，因而不干擾通常的光度法測(cè)量。

5、不易受溫度、離子組成、濃度等因素影響解離度

HEPES除了在細(xì)胞培養(yǎng)基中的使用之外在其他生物研究中，也占有非常重要的地位，因?yàn)樗慌c金屬離子結(jié)合，所以在很多金屬離子研究中都可以使用它，它是三羥氨基甲烷與磷酸鹽的良好替代品。HEPES 也是電子顯微鏡中蛋白質(zhì)沉積技術(shù)的常用緩沖液，因?yàn)樗粫?huì)影響金屬基材。經(jīng)過(guò)評(píng)估并證明HEPES適合與兩性化合物一起使用，為等電聚焦應(yīng)用產(chǎn)生小于 1 個(gè) pH 單位寬的 pH 梯度。在谷氨酸結(jié)合試驗(yàn)的推薦緩沖液中，HEPES也是作為緩沖液，因?yàn)樗梢苑乐古c非受體材料結(jié)合。

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