無菌室一般為4 — 5 平方米、高 2.5 米的獨(dú)立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi),可以用板材和玻璃建造。無菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間,錯(cuò)開門向,以免氣流帶進(jìn)雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉、室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置。在獲得了無菌環(huán)境和無菌材料后,只有保持無菌狀態(tài),才能對某種特定的已知微生物進(jìn)行研究。
無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時(shí)打開超凈臺進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無菌室,再用紫外燈輻照30分鐘。
供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球外表面。
每次操作過程中,均應(yīng)做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
當(dāng)前無菌室多存在于微生物工廠,一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺。超凈臺其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過電動(dòng)裝置使空氣通過過濾器具后進(jìn)入工作臺面,使臺面始終保持在流動(dòng)無菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。
微生物檢驗(yàn)用器材及場所必須進(jìn)行或處理,不同的對象采用不同的處理方法
1. 高壓蒸汽: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓鍋內(nèi),一般采用121℃半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理
2. 火焰:接種針、接種環(huán)等可直接火焰
3. 高溫干燥: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃2小時(shí)
4. 一 般: 無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行,必須用其他方法進(jìn)行處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭,工作人員的手也用此法進(jìn)行
5. 空氣的: 開啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。