1.無菌室應(yīng)設(shè)有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),室內(nèi)溫度保持在18-24℃,濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.無菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
4.無菌室應(yīng)備有工作濃度的液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
在條件較困難的地方,也可以用木制無菌箱代替超凈臺(tái)。無菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,便于移動(dòng),箱正面開有兩個(gè)洞,不操作時(shí)用推拉式小門擋住,操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃,便于在內(nèi)部操作,箱內(nèi)部裝有紫外線燈,從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種等。
定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí),應(yīng)立即徹底。/無菌室無菌程度的測(cè)定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(gè)(平板直徑均9厘米),置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時(shí),然后倒置進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí);測(cè)霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。`霉菌總數(shù)均不得超過10個(gè)為 。
接種針每次使用前后,必須通過火焰燃燒,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物 。帶有菌液的吸管、試管等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%的來蘇兒溶液的桶內(nèi),24h 取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓器中重新后方可處理營(yíng)養(yǎng)基,切記不要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用 5%石碳酸溶液或 3%的來蘇兒傾覆在被污染處至少 30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽后洗滌 。