在獲得了無菌環(huán)境和無菌材料后，還要保持無菌狀態(tài)，才能對某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象，在微生物學(xué)中叫做污染雜菌。

無菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢，便于清洗。工作臺的臺面應(yīng)該處于水平狀態(tài)。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈，無菌室的紫外線燈距離工作臺面 1 米。工作人員進(jìn)入無菌室應(yīng)穿滅過菌的服裝，戴帽子。

定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況，數(shù)應(yīng)控制在10個以下，發(fā)現(xiàn)不符合要求時，應(yīng)立即徹底。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進(jìn)行培養(yǎng)，測總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時；測霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。`霉菌總數(shù)均不得超過10個為 。

微生物檢驗用器材及場所必須進(jìn)行或處理，不同的對象采用不同的處理方法

1． 高壓蒸汽: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓鍋內(nèi)，一般采用121℃半小時,當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理

2． 火焰：接種針、接種環(huán)等可直接火焰

3． 高溫干燥： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃2小時

4． 一 般: 無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行，必須用其他方法進(jìn)行處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭，工作人員的手也用此法進(jìn)行

5． 空氣的： 開啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。