在確定的條件下,帶電粒子在單位電場強度作用下,單位時間內(nèi)移動的距離(即遷移率)為常數(shù),是該帶電粒子的物化特征性常數(shù)。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或雖所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,在同一電場中電泳,經(jīng)一定時間后,由于移動距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場的電壓與電泳時間成正比。
在外加直流電源的作用下,膠體微粒在分散介質(zhì)里向陰極或陽極作定向移動,這種現(xiàn)象叫做電泳。利用電泳現(xiàn)象使物質(zhì)分離,這種技術(shù)也叫做電泳。膠體有電泳現(xiàn)象,證明膠體的微粒帶有電荷。各種膠體微粒的本質(zhì)不同,它們吸附的離子不同,所以帶有不同的電荷。
等電聚焦電泳
是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當(dāng)其處在低于其本身等電點的環(huán)境中則帶正電荷,向負極移動;若其處在高于其本身等電點的環(huán)境中,則帶負電向正極移動。當(dāng)泳動到其自身特有的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點的物質(zhì)后聚焦在各自等電點位置,形成一個個清晰的區(qū)帶,分辨率。
電泳介質(zhì)的pH值
溶液的pH值決定帶電物質(zhì)的解離程度,也決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少.對蛋白質(zhì),氨基酸等類似兩性電解質(zhì),pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當(dāng)分離某一種混合物時,應(yīng)選擇一種能擴大各種蛋白質(zhì)所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質(zhì)的有效分離.為了保證電泳過程中溶液的pH值恒定,必須采用緩沖溶液。