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    2025-01-04 03:17:01 6095次瀏覽
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    電泳所需的儀器有:電泳槽和電源。 1.電泳槽 電泳槽是電泳系統(tǒng)的核心部分,根據(jù)電泳的原理,電泳支持物都是放在兩個(gè)緩沖液之間,電場(chǎng)通過(guò)電泳支持物連接兩個(gè)緩沖液,不同電泳采用不同的電泳槽.常用的電泳槽有: (1)圓盤(pán)電泳槽:有上,下兩個(gè)電泳槽和帶有鉑金電極的蓋。上槽中具有若干孔,孔不用時(shí),用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插電泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。電泳管的內(nèi)徑早期為5~7mm,為保證冷卻和微量化,現(xiàn)在則越來(lái)越細(xì). (2)垂直板電泳槽:垂直板電泳槽的基本原理和結(jié)構(gòu)與圓盤(pán)電泳槽基本相同。差別只在于制膠和電泳不在電泳管中,而是在塊垂直放置的平行玻璃板中間. (3)水平電泳槽:水平電泳槽的形狀各異,但結(jié)構(gòu)大致相同。一般包括電泳槽基座,冷卻板和電極. 電源 要使荷電的生物大分子在電場(chǎng)中泳動(dòng),必須加電場(chǎng),且電泳的分辨率和電泳速度與電泳時(shí)的電參數(shù)密切相關(guān)。不同的電泳技術(shù)需要不同的電壓,電流和功率范圍,所以選擇電源主要根據(jù)電泳技術(shù)的需要.如聚丙烯酰胺凝膠電泳和SDS電泳需要200~600V電壓。

    在電場(chǎng)中液體對(duì)于一個(gè)固體的固定相相對(duì)移動(dòng)稱(chēng)為電滲.在有載體的電泳中,影響電泳移動(dòng)的一個(gè)重要因素是電滲。常遇到的情況是γ-球蛋白,由原點(diǎn)向負(fù)極移動(dòng),這就是電滲作用所引起的倒移現(xiàn)象.產(chǎn)生電滲現(xiàn)象的原因是載體中常含有可電離的基團(tuán),如濾紙中含有羥基而帶負(fù)電荷,與濾紙相接觸的水溶液帶正電荷,液體便向負(fù)極移動(dòng)。由于電滲現(xiàn)象往往與電泳同時(shí)存在,所以帶電粒子的移動(dòng)距離也受電滲影響;如電泳方向與電滲相反,則實(shí)際電泳的距離等于電泳距離加上電滲的距離.瓊脂中含有瓊脂果膠,,其中含有較多的硫酸根,所以在瓊脂電泳時(shí)電滲現(xiàn)象很明顯,許多球蛋白均向負(fù)極移動(dòng)。除去了瓊脂果膠后的瓊脂糖用作凝膠電泳時(shí),電滲大為減弱.電滲所造成的移動(dòng)距離可用不帶電的有色染料或有色葡聚糖點(diǎn)在支持物的中心,以觀察電滲的方向和距離。

    在確定的條件下,帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度作用下,單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離(即遷移率)為常數(shù),是該帶電粒子的物化特征性常數(shù)。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或雖所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,在同一電場(chǎng)中電泳,經(jīng)一定時(shí)間后,由于移動(dòng)距離不同而相互分離。分開(kāi)的距離與外加電場(chǎng)的電壓與電泳時(shí)間成正比。

    酸洗液一般是由無(wú)機(jī)酸加上定量的緩鉵劑,抑制劑或者表面活性劑等涂加劑制成的,它們的性能和處理效果不僅取決地其中起主導(dǎo)作用的酸種類(lèi)和性能,而且還取決于這種酸與其中添加劑的成份及其在水中的含量和之間的配比。酸洗原理中重要的一點(diǎn)是酸與鐵作用時(shí)產(chǎn)生氫氣,使金屬基體表面的氧化皮機(jī)械的剝落,氫氣既有使基體表面氧化皮剝落的正面作用,同時(shí)過(guò)量的氫氣又有腐鉵金屬的品格,導(dǎo)致金屬表面充氫,使金屬變脆的負(fù)面影響,為了減輕“氫脆“對(duì)基體的損傷,在酸中加入合適的緩鉵劑,緩鉵劑能在金屬基體表面形成一層分子膜,以阻礙酸的進(jìn)一步作用,從而達(dá)到緩蝕的目的,抑制劑則有抑制氫氣的撣發(fā)比而起到減輕酸霧揮發(fā)的作用,在酸液中加入一定量的表面活性劑,可使洗液具有除油除銹的雙重作用。

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